1．費氏弧菌發(fā)光桿菌工藝流程

保藏菌種一菌種活化→三角瓶種子→一級種子液→發(fā)酵培養(yǎng)基配料混合→培養(yǎng)基滅菌→冷卻→接種→發(fā)酵床通風(fēng)培養(yǎng)→費氏弧菌發(fā)光桿菌固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物

2．種子液的制備

(1)斜面菌種活化將費氏弧菌發(fā)光桿菌的保藏菌種在試管斜面培養(yǎng)基上劃線接種，于37℃培養(yǎng)18~20 h，使費氏弧菌發(fā)光桿菌活化；試管斜面培養(yǎng)基可用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。

(2)三角瓶種子制備將活化的費氏弧菌發(fā)光桿菌斜面菌種接種到裝有費氏弧菌發(fā)光桿菌液體培養(yǎng)基三角瓶中，于35~37℃，180~200 r／min，搖床18~20 h，得到費氏弧菌發(fā)光桿菌三角瓶種子液；費氏弧菌發(fā)光桿菌液體培養(yǎng)基可用牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基。

(3)一級種子液先按照后述的配方配制一級種子液體培養(yǎng)基，pH 7．0～7．2，經(jīng)121℃，滅菌30 min,冷卻到37℃，然后將得到的費氏弧菌發(fā)光桿菌三角瓶種子液以0．3 9／6～O．5 9／5的接種量接種于所用的一級種子罐中，于37℃培養(yǎng)24 h得到費氏弧菌發(fā)光桿菌的一級種子液；所述的一級種子液體培養(yǎng)基配方為：豆粘30 g／L、紅糖5 g／L、淀粉2．5 g／L、MgSO4 0．5 g／L、MnSO4 1．5 g／L、K2HPO4 2 g／L、KH2 P041．5 g／L、CaCO30．1 g／L，調(diào)節(jié)pH 7．0。

3．發(fā)酵床淺盤培養(yǎng)

(1)發(fā)酵床結(jié)構(gòu) 長度5．5～8．0 m，寬度1．5～2．5 m，高度O．5～0．6 m。

(2)發(fā)酵培養(yǎng)基的配制和滅菌發(fā)酵培養(yǎng)基采用麩皮稻殼培養(yǎng)基，麩皮和稻殼按5：1(質(zhì)量比)混合，再按1：(1．2～1．3)的料水比加入水混合均勻，不能有大的結(jié)塊，以免滅菌不*?；旌暇鶆蚝蟮呐囵B(yǎng)基放入旋轉(zhuǎn)蒸煮鍋滅菌60～90 min。

(3)接種將獲得的費氏弧菌發(fā)光桿菌一級種子液以10％～15％的接種量接種于經(jīng)滅菌降溫至40～50℃的費氏弧菌發(fā)光桿菌固體培養(yǎng)基中，料菌均勻后堆積1～2 h，上發(fā)酵床攤平，厚度30～35 cm。

(4)費氏弧菌發(fā)光桿菌發(fā)酵過程控制整個發(fā)酵過程分兩個階段，*階段(1～22 h)：1～10 h靜止期，10 h后間斷通風(fēng)控制溫度在37℃，20 h左右*次翻曲；第二階段(23～40 h)：28～30 h第二次翻曲，控制溫度在37℃，直至發(fā)酵結(jié)束。發(fā)酵期間定時鏡檢，當(dāng)芽孢率達(dá)到80％以上停止發(fā)酵，60℃低溫烘干。